表皮生长因子对传代培养的大鼠生长板软骨细胞增殖与胶原合成的影响

摘要

目的:探讨不同浓度的表皮生长因子(EGF)对传代培养的大鼠肋生长板软骨细胞(RGC)增殖和胶原合成的影响.方法:分离、培养RGC,分别用Western blot和阿尔新蓝(Alcine blue)染色检测各代RGC中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达;用[3H]-TdR和[3H]-proline掺入分别检测1、10和100μg/L EGF对第1、3和5代RGC增殖和胶原合成的影响.结果:原代培养的RGC表达Ⅱ型胶原和蛋白多糖,从第4代起Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达迅速降低,RGC发生了去分化.[3H]-TdR掺入表明,EGF促进第1代RGC的增殖(P＜0.01),3个浓度的作用依次为:1 μg/L＞10μgL＞100μgL,差异显著(P＜0.01);3个浓度的EGF对第3代RGC保持了相近的促增殖作用(P＜0.01);对第5代RGC均无促增殖作用(P＞0.05).与促增殖作用不同,不同浓度EGF促不同传代的RGC的[3H]-proline掺入率比对照组均高20%左右(P＜0.01).结论:EGF具有促进培养RGC增殖和胶原合成的作用,连续传代引起的去分化降低了RGC对EGF促增殖作用的反应,但对EGF的促胶原合成作用没有产生影响.