细胞移植结合激光肌肉血管重建增强鼠缺血肢体新生血管形成

摘要

目的:研究激光肌肉血管重建(TMR)和血管内皮祖细胞(EPCs)移植相结合能否增强缺血肢体新生血管形成.方法:密度梯度法分离脐带血单个核细胞并体外培养,免疫组织化学和流式细胞术定量和定性分析.应用DiI标记注射入激光孔道和缺血区的EPCs.结扎裸鼠右侧髂外动脉造成急性肢体缺血模型,随机分为:TMR+EPCs组:EPCs移植入缺血区肌肉的激光孔道;TMR组:缺血区肌肉激光打孔;EPCs组:注射EPCs至缺血区肌肉;对照组:缺血肢体模型.超声多谱勒测定缺血和非缺血后肢的股动脉血流获得比值(FAFI),组织化学和免疫组织化学检查缺血肢体肌肉标本.结果:贴壁细胞表达KDR、CD34、AC133、CD31和vWF,并且吞噬Ac-LDL,有内皮细胞功能,培养7 d的细胞流式细胞术检查CD34(62%±7%)和AC133(57.2%±9.8%)阳性.术后28 d,TMR+EPCs、EPCs和TMR组FAFI明显高于各自基线水平;TMR+EPCs和EPCs组FAFI明显高于对照组.TMR+EPCs组新生血管形成明显多于对照组.结论:TMR和EPCs移植结合明显改善了缺血肢体的灌注并增强了缺血肢体新生血管形成.