载脂蛋白A-I模拟肽L-4F减轻过氧化氢诱导的小鼠骨髓内皮祖细胞损伤

摘要

目的:研究载脂蛋白A-I模拟肽L4F是否减轻过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的小鼠骨髓来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)氧化应激损伤及其机制.方法:通过密度梯度离心法分离小鼠骨髓单个核细胞,条件培养基EGM-2MV诱导分化培养EPCs.对培养EPCs先以PI3 K/AKT抑制剂LY294002(30μmol/L)干预2h后加入L-4F(75 mg/L)4 h,再加入100μmol/L H2O2 24 h.MTT法检测细胞活力,试剂盒检测各实验组培养基超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,以评价细胞氧化与抗氧化平衡及脂质过氧化程度;流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;免疫印迹法检测p-AKT蛋白水平.结果:L-4F预处理显著抑制了H2 O2诱导的细胞活力降低、SOD活性下降、MDA含量增加及细胞凋亡.H2O2下调p-AKT的蛋白水平,L-4F呈浓度依赖性地上调p-AKT的蛋白水平.LY294002抑制了L-4F减轻EPCs损伤的作用.结论:载脂蛋白A-I模拟肽L-4F部分通过PI3K/AKT通路减轻H2O2诱导的EPCs氧化应激损伤.