载脂蛋白A-I模拟肽D-4F减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

摘要

目的研究载脂蛋白A-I(ApoA-I)模拟肽D-4F对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)的保护作用及其机制。方法将6～8周龄的雌性BALB/C小鼠随机分为假手术(Sham)组、D-4F组、LPS组和LPS+D-4F组,每组6只。LPS组和LPS+D-4F组小鼠在气管内缓慢注射50μL LPS(1mg/kg)诱导ALI,Sham组和D-4F组小鼠则在气管内注射等量无菌0.9%氯化钠溶液;术后1h,D-4F组和LPS+D-4F组小鼠分别予腹腔内注射200μL D-4F(14mg/kg),Sham组和LPS组小鼠分别予腹腔内注射等量无菌0.9%氯化钠溶液。造模后6h,取小鼠肺泡灌洗液(BALF)和肺组织。采用二喹啉甲酸(BCA)法测定BALF总蛋白质质量浓度,根据肺组织湿/干质量比(W/D)评估肺水肿程度,经H-E染色观察肺组织病理学改变,采用ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-6和IL-1β的表达水平,采用Western印迹法检测肺组织中磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(p-IκBα)、磷酸化NF-κB抑制蛋白激酶(p-IKK)的表达水平。结果 D-4F组与Sham组间BALF总蛋白质质量浓度、BALF炎性细胞因子表达水平、病理学评分,以及肺组织p-IKK、p-IκBα、p-NF-κB相对蛋白质表达水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05);LPS组的BALF总蛋白质质量浓度、BALF炎性细胞因子表达水平、病理学评分,以及肺组织p-IKK、p-IκBα、p-NF-κB相对蛋白质表达水平均显著高于Sham组、D-4F组和LPS+D-4F组(P值分别<0.01、0.05)。LPS组小鼠肺组织W/D较Sham组有升高趋势,LPS+D-4F组的肺组织W/D较LPS组有降低趋势,但各组间肺组织W/D的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。光学显微镜下可见,Sham组和D-4F组小鼠肺组织无明显损伤,LPS组小鼠的肺组织损伤明显,而LPS+D-4F组小鼠的肺组织损伤较LPS组显著减轻。结论 ApoA-I模拟肽D-4F通过抑制NF-κB通路减少BALF炎性细胞因子表达,减轻肺组织损伤,对小鼠ALI具有保护作用。