负向调节多药耐药基因1转录逆转肿瘤细胞多药耐药

摘要

目的研究负向调节肿瘤细胞多药耐药基因1(mdr-1)转录激活部位对其多药耐药的逆转作用.方法多种ASODN/质脂体复合物转染乳腺癌耐药细胞株后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞的多药耐药-1 mRNA、免疫组织化学标记链霉素卵白素生物素法(LSAB)检测细胞P-糖蛋白表达、罗丹明123外排实验检测P-糖蛋白的转运功能.结果转染反义寡核苷酸(ASODN )48 h后,封闭MA区(主要转录起始部位)、MI区(次要转录起始部位)、C区(CAAT盒子)、G区(GC 盒子)实验细胞的mdr-1指数分别为1.4、1.9、1.6、2.1,P-糖蛋白表达阳性率分别为14%、43%、26%、39%,罗丹明相对荧光强度分别为125%、 83%、 102%、77%.其中封闭MA区和C区实验细胞与耐药细胞的差异有显著性P＜0.05.结论封闭mdr-1启动子的主要转录起始部位和启动子上游的CAAT盒子可降低肿瘤细胞mdr-1 mRNA和P-糖蛋白含量,抑制其转运功能.负向调节肿瘤细胞的这些转录调节部位可通过抑制mdr-1 mRNA的转录逆转其多药耐药.封闭mdr-1启动子的次要转录起始部位和上游的GC盒子则无明显作用.