FCU／5-氟胞嘧啶自杀基因前体药物系统联合放射治疗鼻咽癌的实验研究

摘要

目的体外、原位、体内实验观察FCU／5-氟胞嘧啶（5一FC）联合γ射线对鼻咽癌CNE-2细胞的杀伤效应,以预测其对鼻咽癌的治疗作用。方法电穿孔法将重组质粒pcDNA3．1（-） CMVe．Egr-1．FCU转染CNE-2细胞,600μg/ml G418筛选14 d获得稳定表达FCU基因的CNE-2细胞,免疫印迹法鉴定FCU基因的表达。四甲基偶氮唑盐法（MTT）检测5-FC联合不同剂量的γ射线对FCU基因表达阳性的CNE-2细胞的杀伤效应。进行原位基因治疗:取5×106对数生长期的CNE-2细胞接种裸鼠右腋下,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,接种细胞12 d后将裸鼠随机分成7组,观察不同处理对各组移植瘤生长的抑制作用。进行体内基因治疗:取5×106对数生长期表达FCU基因的CNE-2细胞接种裸鼠右腋下致瘤,接种细胞后的第5天,将裸鼠随机分成7组,观察不同处理对各组移植瘤生长的抑制作用。结果从转染细胞总蛋白中检测到相对分子质量42 000的预期蛋白。体外实验中,γ射线组细胞的相对存活率为15．85％～97．88％,而5-Fc（100μg／ml）+γ射线组细胞的相对存活率是6．58％-50．00％,两组差异有统计学意义（P＜0．01）;5-FC+γ射线（1．0 Gy）组细胞的相对存活率分别是2．37％～35．87％,明显低于5-FC组细胞的相对存活率12．11％～99．51％（P＜ 0．01）。原位基因治疗和体内基因治疗实验结果表明在5-FC或者γ射线干预下,鼻咽癌移植瘤生长不同程度受到抑制,5-FC或（和）γ射线干预组的肿瘤体积明显小于对照组或PBS干预组（P＜ 0．05）,以5-FC联合γ射线组明显。结论FCU／5-FC联合γ射线对鼻咽癌CNE-2细胞具有杀伤作用,其有协同治疗鼻咽癌的效应。