血管紧张素Ⅱ与其介导的蛋白质酪氨酸激酶JAK2信号通路在缺血再灌注肾损伤时小管上皮细胞逆向分化中的作用

摘要

目的探讨血管紧张素（Ang）Ⅱ与其介导的蛋白酪氨酸激酶JAK2信号通路在急性缺血再灌注肾损伤模型中发生的肾小管上皮细胞逆向分化的作用机制。方法 （1）建立Wistar大鼠急性缺血再灌注肾损伤模型,采用放射免疫法检测肾脏局部Ang Ⅱ的水平变化,采用免疫组织化学ABC法和RT-PCR,观察间充质细胞表面标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。（2）模拟高、中、低浓度的肾素-血管紧张素系统（RAS）环境,体外观察培养的肾小管上皮细胞（NRK-52E）逆向分化的情况。（3）先后阻断AngⅡ受体（AT2R）及其介导的Ang Ⅱ信号转导通路的JAK2,研究AngⅡ与JAK2通路对肾小管上皮细胞逆向分化的影响。结果 （1）肾脏缺血再灌注损伤后0、24、48、72、96、120 h,局部AngⅡ含量持续增高,分别为（406.7±106.1）、（463.0±112.9）、（526.6±128.3）、（649.5±131.5）、（875.4±150.2）、（980.8±155.2）ng/L,P＜0.05。（2）缺血再灌注后48 h,肾小管上皮细胞开始表达α-SMA mRNA及蛋白质。（3）高浓度(10-7mol/L)AngⅡ刺激可诱导体外培养的肾小管上皮细胞表达α-SMA,且呈剂量和时间依赖性。10-9mol/L浓度AngⅡ刺激30 min时,α-SMA表达水平最高。无论是阻断AT2R抑或JAK2信号通路,肾小管上皮细胞表达α-SMA均明显受到抑制。结论急性缺血再灌注损伤时肾小管上皮细胞可向间充质细胞逆向分化,局部RAS启动与其密切相关。AngⅡ可能通过AT2R及其介导的JAK2信号通路促发肾小管细胞的逆向分化。