慢性氟中毒大鼠大脑皮质神经细胞线粒体分布及其分裂基因表达改变

摘要

目的探讨慢性氟中毒大鼠大脑皮质神经细胞胞体和突触内线粒体分布情况及线粒体分裂基因Fis表达的改变。方法 SD大鼠60只,雌雄各半,体质量100～120 g,按完全随机设计法分为3组,每组20只。在饮水中加入不同剂量的氟（0、10和50 mg/L）来饲养,实验期6个月。采用荧光素标记细胞色素C氧化酶Ⅳ亚型1抗体显示线粒体,观察线粒体在神经细胞胞体和突触内分布;用即时荧光定量PCR、Western blot和免疫组织化学SP方法检测线粒体分裂基因Fisl表达。结果染氟组大鼠出现不同程度的氟斑牙,尿氟含量明显升高,表明成功地复制了慢性氟中毒大鼠模型。饲以l0 mg/L和50 mg/L的染氟大鼠胞体内聚集型的神经细胞数[（34.8±4.7）和（39.3±3.0）]较对照组（4.4±2.3）显著增加（P＜0.05）;分裂基因Fisl mRNA转录水平[（3773±1292）和（1274±162）]较对照组（277±73）显著升高（P＜0.05）;Fisl蛋白免疫组织化学强阳性表达神经细胞数[（54.0±3.6）和（51.3±4.1）]和Western blot法蛋白印迹平均吸光度值[（2.9±0.4）和（2.6±0.6）]水平较对照组[（25.2±2.5）和（1.8±0.2）]明显升高（p＜0.05）。结论摄入过量的氟可导致大鼠大脑皮质神经细胞线粒体在胞体和突触内重分布,诱导线粒体Fisl基因表达,促进线粒体分裂。神经细胞线粒体重分布可能与神经细胞Fisl高表达导致线粒体功能障碍有关。