胰腺癌细胞系BxPC3及胰腺癌组织Ras相关区域家族1A启动子CpG岛的甲基化状态

摘要

目的检测Ras相关区域家族1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）在胰腺癌细胞株BxPC3及胰腺癌组织中的甲基化状态,探讨其启动子异常甲基化在胰腺癌发病机制中的可能作用。方法采用结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法（combined bisulfite restriction analysis,COBRA）检测胰腺癌细胞株BxPC3、5例正常胰腺组织、13对胰腺癌及相应癌旁正常胰腺组织中RASSF1A启动子CpG岛的甲基化状态,计算其甲基化率。以甲基化酶抑制剂5-Aza-dC（5-Aza-2-deoxycitydine）处理BxPC3,观察处理前后甲基化率变化情况及RASSF1A mRNA表达变化。结果在BxPC3细胞株中,RASSF1A启动子的CpG岛甲基化率为62.90%;正常胰腺、癌旁及癌组织中平均分别为9.14%、53.79%和55.82%。与正常胰腺组织相比,胰腺癌旁及癌组织的RASSF1A启动子甲基化率明显增高（P值＜0.01）,而癌旁及癌组织之间无明显差异（P＞0.05）。BxPC3经5-Aza-dC处理后,RASSF1A的CpG岛甲基化率显著下降至42.50%（P＜0.05）,同时RASSF1A mRNA表达增强。结论 RASSF1A启动子CpG岛异常甲基化是胰腺癌发生发展中的早期事件,可能参与胰腺癌的发病过程。