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胃癌组织中Caveolin-1基因外显子2及Caveolin-2基因启动子区域CpG岛甲基化状态检测

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前言

第一部分 胃癌组织中Caveolin-1基因外显子2甲基化状态检测

材料与方法

结果

讨论

第二部分 胃癌组织中Caveolin-2基因甲基化状态检测

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

今后研究的展望

胃癌干细胞研究进展

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摘要

目的:检测胃癌组织中Caveolin-1基因外显子2启动子区域及Caveolin-2基因启动子区域5’端CpG岛的甲基化状态,探讨Caveolin-1基因及Caveolin-2基因启动子区域5’端CpG岛甲基化在胃癌发生发展中的作用及其与临床病理特征的关系。 方法:收集胃癌组织及距肿瘤5㎝以上的癌旁正常胃组织,运用标准蛋白酶K消化、酚-氯仿抽提法提取组织中基因组DNA,采用DNA修饰试剂盒(CpGenome DNA Modification Kit)对DNA进行修饰后分别以甲基化特异性引物及非甲基化引物进行PCR,通过琼脂糖凝胶电泳及产物测序判定结果。 结果: 1.6例正常胃组织标本Caveolin-1基因外显子2启动子区域5’端CpG岛均为甲基化阴性。30例胃癌组织标本中,27例标本甲基化阳性,甲基化率为90%,其中16例癌组织(53.3%)表现为完全甲基化,11例癌组织(36.7%)表现为部分甲基化,3例标本表现为甲基化阴性。统计学结果显示胃癌组织中Caveolin-1基因外显子2启动子区域5’端CpG岛甲基化率显著高于正常组织(p<0.05)。 2.经Fisher确切概率法检验,胃癌组织中Caveolin-1基因外显子2启动子区域5’端CpG岛甲基化状态与胃癌组织分化程度、患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、有无淋巴结转移及有无脉管侵犯等临床病理特征无关(p>0.05)。 3.5例正常胃组织Caveolin-2基因启动子区域5’端CpG岛均为甲基化阴性。33例胃癌组织中,29例甲基化阳性,甲基化率为87.9%,其中20例癌组织(60.6%)表现为完全甲基化,9例癌组织(27.3%)表现为部分甲基化,4例癌组织(12.1%)表现为甲基化阴性。统计学结果显示癌组织中Caveolin-2基因启动子区域5’端CpG岛甲基化率显著高于正常组织。 4.经Fisher确切概率法检验,胃癌组织中Caveolin-2基因启动子区域5’端CpG岛甲基化状态与胃癌组织分化程度、患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、有无淋巴结转移及有无脉管侵犯等临床病理特征无关(p>0.05)。 结论: 1.胃癌组织中存在Caveolin-1基因外显子2启动子区域5’端CpG岛高甲基化,启动子区域5’端CpG岛甲基化可能参与胃癌的早期过程。 2.胃癌组织中存在较高的Caveolin-2基因启动子区域5’端CpG岛甲基化率,该基因甲基化可能与胃癌的发生发展有关。

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