携带Mathl基因的重组腺病毒构建和鉴定及在豚鼠耳蜗中的表达

摘要

目的 探讨利用重组腺病毒介导的Mathl基因转移治疗感音神经性耳聋的可行性.方法 利用腺病毒细菌内同源重组方法,构建携带Mathl基因的复制缺陷型重组腺病毒Ad-Mathl,通过向豚鼠耳蜗底回注射重组腺病毒Ad-Mathl后,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内耳Mathl的mRNA的表达,Western Blot方法检测Mathl蛋白表达.结果 构建的重组腺病毒Ad-Mathl酶切电泳鉴定正确,重组腺病毒Mathl通过底回导入豚鼠耳蜗24小时后检测到Mathl的mRNA表达:Western Blot方法检测到Mathl蛋白的表达.结论 本实验成功构建了携带Mathl基因的重组腺病毒,由腺病毒介导的Mathl基因转移可在豚鼠耳蜗内有效表达.