转化生长因子β对大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响

摘要

目的探讨转化生长因子β对大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响.方法实验中取雌性S-D大鼠4肢松质骨,应用胶原酶消化法得到大量纯净成骨细胞;进行形态学观察,检测不同培养时间的细胞培养液的上清液中成骨细胞特征性分泌物:碱性磷酸酶(AKP)和骨钙素(OCN)的含量;碱性磷酸酶(ALP)染色(改良Gomori氏钙-钴法);通过免疫组化法(SP法)进行雌激素受体染色;用不同浓度的TGF-β作用于体外培养的成骨细胞,进行SDS-PAGE电泳和Western-blot检测雌激素受体.结果成骨细胞上清液AKP和OCN的分泌量明显高于成纤维细胞(P＜0.01),形态学观察符合成骨细胞的特征.经免疫组化染色大鼠的成骨细胞存在雌激素受体,且位于胞核内.Western-blot结果显示,雌激素受体在TGF-β浓度为0.1～0.5 ng/ml时,有较强的荧光发光信号条带.结论TGF-β在浓度为0.1～0.5 ng/ml时,能提高成骨细胞雌激素受体基因表达水平,这可为研究TGF-β对于成骨细胞雌激素受体的作用机制及骨代谢疾病药物筛选提供新的支持.