贝尼地平对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化体外研究

摘要

目的 在体外环境下探讨贝尼地平对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响.方法 C57/BL6小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)在成骨诱导培养基条件下经过1μmol/L、10 μmol/L和100μmol/L浓度的贝尼地平(BD)处理,1天和14天后采用CCK8法检测细胞增殖情况,以及14天后采用碱性磷酸酶(ALP)染色检测ALP表达量,蛋白免疫印迹(Western Bloting)法检测成骨特征蛋白骨钙素(OCN)和核心结合蛋白因子2(Runx2)以及WNT/β-catenin信号通路关键蛋白β-链蛋白(β-catenin)和低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)蛋白的表达.结果 在本次研究中,贝尼地平浓度在1～100 μmol/L对细胞没有毒性作用(P＞0.05);所有浓度的贝尼地平处理组(1～ 100 μmol/L)中ALP表达量均增加(P＜0.05),并出现浓度依赖性,随着贝尼地平浓度的增加促进BMSCs表达ALP能力相应增强(P＜0.05);贝尼地平促进所有处理组(1～100 μmol/L)中Runx2的表达(P＜0.05),并出现浓度依赖性,在贝尼地平浓度为100 μmol/L时促进作用最强(P＜0.05);OCN的表达随着贝尼地平浓度的增加而相应增加(P＜0.05),在贝尼地平浓度为100 μmoL/L时达到最大(P＜0.05);贝尼地平促进β-catenin表达(P＜0.05),出现随贝尼地平浓度增加而表达增强,促进作用在贝尼地平浓度为100 μmol/L时达到最大(P＜0.05);而LRP5的表达在贝尼地平的作用下得到加强(P＜0.05)并出现浓度依赖性,在贝尼地平浓度为100μmol/L时达到最大(P＜0.05).结论 贝尼地平在体外能通过上调WNT/β-catenin信号通路活性促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,这对高血压合并骨质疏松患者而言是一个良好的治疗药物.