应用富集骨髓干细胞技术治疗骨缺损

摘要

目的 探讨富集骨髓干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)移植技术促进骨修复的疗效及其影响因素.方法 应用富集干细胞技术,在术中完成骨髓血采集、BMSCs富集,通过局部注射或与多孔β-磷酸三钙材料复合后回植,治疗骨缺损患者49例.对富集前后骨髓有核细胞(nucleated cells,NCs)和碱性磷酸酶染色阳性的细胞集落(colony-forming units with alkaline phosphatase+,CFUs/ALP+)计数,分析年龄、性别、病种对骨髓干细胞的影响;通过扫描电镜观察多孔材料与细胞的复合情况;结合影像学检查综合评定疗效.结果 平均抽取骨髓血(250±37)ml,经富集技术平均回收(50±19)ml,骨髓成骨源性干细胞回收率78%±18%.其中CFUs/ALP+的自然对数与年龄呈线性负相关(r=-0.4910,P=0.008),NCs与年龄无相关性(r=-0.0469,P=0.8126).骨髓NCs和CFUs/ALP+的数量无性别差异(t=0.6242,P=0.5397;χ2=2.6512,P=0.1035).骨折组患者的骨髓CFUs/ALP+数量比退变组多(t=2.2793,P=0.0327),而NCs数量的差异无统计学意义(t=0.7600,P=0.4553).通过富集,NCs与CFUs/ALP+的增长倍数呈线性正相关(r=0.4054,P=0.0324).复合2 h后,富集BMSCs可在多孔β-磷酸三钙孔内壁贴附.全部病例随访(15.4±6.4)个月,总有效率91.8%.富集血样细菌学检测阴性率100%.术后伤口渗出或肿胀4例,均自行愈合.结论 自体富集BMSCs技术是一种快速、简便、安全的临床细胞治疗手段,可与手术同步进行,促进骨修复和再生.年龄、病种因素对BMSCs数量的影响较大.