血管生成素1对高糖环境中猴脉络膜-视网膜内皮细胞的保护作用

摘要

目的 探讨高浓度葡萄糖对内皮细胞(endothelial cell,EC)单层通透性模型通透性的影响以及血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)对此的保护作用.方法 将猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)接种于孔径0.8μm聚碳酸酯微孔滤膜中,形成致密单层后分三组培养.正常对照组:DMEM高糖培养基,含葡萄糖25 mmol/L;高糖组:DMEM培养基,含葡萄糖40 mmol/L;Ang-高糖组:DMEM培养基.含葡萄糖40mmol/L+Ang-1 250 ng/ml.于第1天、第3天、第5天、第7天4个时间点建立EC单层通透性模型,检测蛋白质渗透压反射系数(δ)及滤过系数(Kf),以监测EC单层通透性的变化;利用Western blot(NBT/BCIP显色法)检测第5天时survivin的表达.结果 第3天、第5天及第7天时,高糖组EC单层通透性增高(P<0.01),Ang-高糖组在第5天及第7天时,EC单层通透性升高(P<0.01),但仍低于高糖组:Western blot结果显示,Ang-高糖组survivin表达明显高于其他各组(P<0.01).结论 高糖能够增加EC单层通透性.Ang-1能对抗高糖的这种生物学作用.它可能是通过上调凋亡抑制基因survivin的表达,抑制RF/6A的凋亡而发挥生物学作用.