眼内灌注液对鼠视网膜神经上皮层细胞活力影响的体外实验研究

摘要

目的比较不同眼内灌注液对视网膜神经上皮层细胞活力及抗氧化作用的影响,以寻找理想的眼内灌注液.方法原代培养新生大鼠视网膜神经上皮层细胞分为A、B、C、D、E组,其中A组为对照组,为含血清DMEM/F12培养液,其余4组分别用BSS plus、BSS plus+药物(妥布霉素16 000 U/L、地塞米松16 mg/L和盐酸肾上腺素l mg/L)、自制灌注液和乳酸林格液+药物4种眼内灌注液,分别孵育细胞4、12、24、48 h后,检测各组细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活性、乳酸脱氢酶(LDH)释放率和细胞凋亡的阳性率;在不同灌注液中加入30 μmol/L H2O2诱导细胞氧化损伤,4 h后检测各组细胞的脂质过氧化物分解产物丙二醛(MDA)的含量.结果各灌注液组细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活性随时间延长呈下降趋势,LDH释放率和凋亡阳性率呈上升趋势(P＜0.05),而同一时间点不同组对细胞活力影响由小到大为:B组、C组、D组和E组,其中C组和D组差异无显著意义(P＞0.05).在抗氧化作用方面,B组、C组和D组的细胞内MDA含量明显少于E组(P＜0.01),且3组之间差异无显著意义(P＞0.05).结论自制灌注液在乳酸林格液中添加了碳酸氢盐、葡萄糖、氧化型谷胱甘肽及药物妥布霉素、盐酸肾上腺素、地塞米松后,除具有与BSS plus液相似的抗氧化能力和缓冲能力外,还提供了更多的能量来源和抗感染、抗炎、扩瞳的作用,与加入了药物后的BSS plus液对细胞活力的影响作用基本相似,并且价格便宜,具有很好地开发应用前景.(中华眼科杂志,2004,40:453-458)