应用串联质谱法对成年男性正常晶状体纤维进行蛋白质组分析

摘要

目的 建立成年男性正常晶状体纤维蛋白表达谱.方法 晶状体纤维总蛋白质通过聚丙烯酰胺凝胶电泳初步分离、胶内酶切后的多肽利用反相液相色谱串联质谱的方法,对成年男性正常晶状体中的全部纤维蛋白质进行鉴定.根据高丰度离子的匹配率、匹配离子的连续性和随机性评分,通过SEQUEST和AMASS软件筛选结果.同一样品重复进行3次实验,具有可信度＞98%、有2个或2个以上合格谱图、不少于2次实验均鉴定的蛋白质作为阳性结果.结果 实验室共鉴定60个蛋白质,有22个晶状体蛋白质在以前的晶状体蛋白质组研究中有过鉴定.结论 该研究建立了成年男性正常晶状体纤维蛋白质表达谱.聚丙烯酰胺凝胶电泳与液相色谱串联质谱相结合是简单、高灵敏度的蛋白质组学方法,适用于研究晶状体纤维的蛋白质随年龄及白内障形成过程中的变化.