靶向信号转导和转录激活因子3的小干扰RNA对体内外乳腺癌细胞生长的抑制作用

摘要

目的观察沉默信号转导和转录激活因子3（STAT3）基因对乳腺癌细胞MCF7体内外生长的抑制作用,探讨STAT3基因作为乳腺癌治疗靶点的可行性和有效性。方法应用RNA干扰技术抑制MCF7细胞STAT3基因的表达,半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测STAT3 mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测MCF7细胞的凋亡率,四甲基偶氮唑蓝（MTF）法检测MCF7细胞的增殖情况。在裸鼠皮下移植转染了STAT3 siRNA的MCF7细胞,观察其成瘤性。半定量RT-PCR和Western blot法检测成瘤标本的STAT3 mRNA和蛋白的表达。结果转染48h后,STAT3 siRNA转染组、非特异siRNA转染组和空白对照组的STAT3 mRNA表达量分别为0.327±0.020、1.035±0.050和1.093±0.018;转染72h后,3组STAT3蛋白表达量分别为0.153±0.006、1.320±0.033和1.374±0.022,STAT3 siRNA转染组的STAT3 mRNA和蛋白表达水平,较非特异siRNA转染组和空白对照组均明显降低（P＜0.05）。MTT实验结果显示,STAT3 siRNA转染组和非特异siRNA转染组的细胞生长抑制率分别为（44.00±5.10）%和（16.10±1.05）%,STAT3 siRNA转染组的细胞增殖能力明显下降（P＜0.05）。流式细胞仪分析显示,STAT3 siRNA转染组、非特异siRNA转染组和空白对照组的细胞凋亡率分别为（14.79±0.22）%、（8.45±0.43）%和（7.06±0.71）%,STAT3 siRNA转染组明显高于非特异siRNA转染组和空白对照组（P＜0.05）。STAT3siRNA转染组、非特异siRNA转染组和空白对照组在裸鼠体内最终的成瘤体积分别为（41.15±12.17）mm~3、（101.36±21.90）mm~3和（118.45±24.68）mm~3,移植瘤重量分别为（21.4±10.6）mg、（57.2±21.9）mg和（88.6±12.2）mg,STAT3 siRNA转染组的移植瘤体积和重量明显低于非特异siRNA转染组和空白对照组（P＜0.05）。STAT3 siRNA转染组移植瘤组织的STAT3 mRNA和蛋白表达水平均明显降低。结论靶向STAT3的siRNA可以抑制乳腺癌MCF7细胞体内外的生长,STAT3有可能成为新的乳腺癌治疗靶点。