顺铂通过促进死亡受体4在脂筏内聚集增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对胃癌MGC803细胞凋亡的作用

摘要

目的探讨顺铂影响胃癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）敏感性的机制。方法以顺铂和TRAIL单独及联合作用MGC803细胞,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定各组细胞的增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测caspase-8和caspase-3的蛋白表达,免疫荧光显微技术观察脂筏和死亡受体4（DR4）的分布。以50 mg/L的制霉菌素预处理MGC803细胞1 h,之后加入顺铂和TRAIL,观察细胞凋亡的变化。结果 100μg/L TRAIL作用MGC803细胞24 h,增殖抑制率为（8.51±3.45）%,细胞凋亡率为（3.26±0.89）%。8.49 mg/L顺铂作用MGC803细胞24 h,增殖抑制率为（52.58±4.57）%,细胞凋亡率为（23.10±3.41）%。100μg/L TRAIL和8.49 mg/L顺铂联合作用时,细胞增殖抑制率提高至（76.43±5.35）%,细胞凋亡率提高到（42.56±4.11）%,均高于相同浓度顺铂和TRAIL单独作用组（P＜0.05）。同时检测到caspase-8和caspase-3的裂解。TRAIL未引起明显的脂筏和DR4聚集,而顺铂明显促进了DR4在聚集脂筏内的定位。50mg/L制霉菌素处理MGC803细胞24 h,细胞凋亡率为（3.66±0.52）%。经制霉菌素预处理后,顺铂作用下MGC803细胞的凋亡率为（22.76±2.97）%,与未经制霉菌素预处理组[（25.74±3.28）%]差异无统计学意义（P=0.248）;而顺铂和TRAIL联合作用下细胞凋亡率为（31.52±3.99）%,与未经制霉菌素预处理组[（43.16±4.26）%]差异有统计学意义（P＜0.001）。结论顺铂通过促进死亡受体在脂筏聚集增强了TRAIL诱导的胃癌MGC803细胞凋亡。