链亲和素标记的白细胞介素4双功能融合蛋白锚定治疗小鼠浅表性膀胱癌

摘要

目的探讨链亲和素标记的白细胞介素4（IL4-SA）双功能融合蛋白治疗小鼠浅表性膀胱癌的效果。方法制备IL4-SA双功能融合蛋白,测定其体外生物学活性。建立小鼠浅表性膀胱癌模型,膀胱经生物素化后给予IL4-SA灌注治疗,观察小鼠生存期,并以链亲和素标记的绿色荧光蛋白（GFP-SA）+IL-4和磷酸盐缓冲液（PBS）作为对照组。检测各组小鼠脾细胞的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀伤活性和CD8+肿瘤浸润淋巴细胞。结果 IL4-SA能够锚定于生物素化的膀胱表面达5 d以上。在MB49细胞种植后的第80天,PBS组小鼠全部死亡,GFP-SA+IL4组小鼠存活2只,而IL-4-SA组小鼠存活5只。在肿瘤特异性杀伤实验中,在效靶比为1:1、25:1、50:1时,PBS组小鼠的CTL杀伤率分别为（3.3±0.6）%、（7.3±0.6）%和（12.7±2.1）%,GFP-SA+IL-4组小鼠的CTL杀伤率分别为（4.3±0.6）%、（9.0±1.0）%和（14.3±1.5）%,而IL4-SA组小鼠的CT[杀伤率分别为（11.3±1.2）%、（22.7±1.5）%和（31.0±3.0）%,IL-4-SA组与PBS组和GFP-SA+IL-4组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。CD8+淋巴细胞检测结果显示,PBS组和GFP-SA+IL-4组的肿瘤组织内仅有少量的CD8+淋巴细胞浸润,而IL-4-SA组则有较多的CD8+淋巴细胞浸润。结论 IL-4-SA锚定膀胱表面能够产生强烈、持久的免疫应答反应,有可能成为浅表性膀胱癌的一种新灌注治疗方法。