真核细胞起始因子阻滞对LS-174T细胞乙酰肝素酶表达及活性的影响

摘要

目的 确定结肠癌细胞中真核细胞起始因子 4E（eukaryoticinitiationfactor 4E ,eIF 4E）是否在帽依赖翻译水平上调控乙酰肝素酶的表达 ,并对乙酰肝素酶表达和肿瘤细胞侵袭性改变的相关性进行探讨。方法 采用Westernblot和RT PCR方法 ,分别检测eIF 4E被阻抑后其转录和翻译水平的改变。乙酰肝素酶活力是以其将大分子放射性元素 （3 5 S）标记硫酸乙酰肝素底物降解为小分子的能力来确定。癌细胞侵袭力改变使用膜浸润培养系统来检测。结果 反义寡核苷酸 （asODN）经脂质体转染LS 174T细胞后 ,eIF 4E基因表达明显抑制 ,其蛋白表达也显著下降。伴随eIF 4E被阻抑 ,LS 174T细胞乙酰肝素酶的活力和蛋白表达量均下降 ,并伴有癌细胞体外侵袭力的下降。结论 eIF 4E在翻译步骤对乙酰肝素酶表达具有调控作用 ,可作为调节乙酰肝素酶表达的治疗靶点