油酸在黄曲霉毒素诱导肝细胞损伤中的保护作用

摘要

为了解油酸在黄曲霉毒素B 1(aflatoxin B 1,AFB 1)诱发的肝损伤中所起的保护作用,以体外培养的肝细胞(L-02)作为靶细胞,研究油酸的保护机制.设置3组实验:对照组(无处理)、AFB 1组(只有AFB 1)和油酸组(AFB 1和油酸共同处理),药物处理24h后显微镜观察细胞形态,细胞增殖-毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测细胞活力,荧光法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率,蛋白质免疫印迹检测血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)、Caspase-3以及Survivin蛋白的表达.采用t检验或单因素方差分析进行统计分析.结果发现:与对照组相比,AFB 1暴露能够明显抑制肝细胞活力(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.001),升高ROS水平(P<0.001);与AFB 1组相比,油酸作用后细胞活力显著增加(P<0.01),细胞凋亡减少(P<0.01),ROS水平降低(P<0.001),同时显著提高了HO-1(P<0.05)和抑凋亡蛋白Survivin的表达(P<0.05),降低了凋亡蛋白Caspase-3(P<0.01)表达.因此认为油酸对AFB 1引发的肝细胞损伤具有保护作用,其机制可能与其通过促进抗氧化酶蛋白HO-1的表达,降低氧化应激水平,从而降低细胞凋亡有关.