低浓度氯喹保护成年小鼠视网膜神经节细胞抵抗N-甲基-D-天冬氨酸的兴奋性毒性作用

摘要

目的 观察不同浓度氯喹对N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）损伤模型小鼠RGC的保护作用及可能调控机制。方法 健康雄性C57/BL6小鼠54只,随机分为氯喹低浓度组、氯喹高浓度组、PBS对照组,每组均为18只。氯喹低浓度组、氯喹高浓度组小鼠分别按体重10、100 mg/kg剂量腹腔注射氯喹；PBS组小鼠腹腔注射等体积PBS。腹腔注射1次/d,连续2d后,氯喹低浓度组、氯喹高浓度组小鼠左眼玻璃体腔注射5 nmol/L NMDA,对侧眼注射等体积PBS。建模后7d,视网膜铺片RGC染色,计数RGC存活数目；建模后9、10d,分别行视动反应和ERG检查；建模后11 d,行视网膜免疫荧光染色检测各组小鼠视网膜胶质纤维酸性蛋白（GFAP）荧光表达和实时荧光定量PCR （RT-PCR）检测各组小鼠视网膜GFAP、TNF-α、IL-6 mRNA表达。各组间RGC密度、视敏度、光负性反应（PhNR）波振幅比较采用单因素方差分析。结果 建模后7d,与PBS对照组小鼠RGC密度比较,氯喹低浓度组显著升高,差异有统计学意义（F=54.41,P＆0.01）；氯喹高浓度组降低,但差异无统计学意义（F=1.18,P＆0.05）。氯喹低浓度组小鼠视敏度、PhNR波振幅均高于PBS对照组,差异有统计学意义（F=9.10、17.60,P＆0.05、＆0.01 ）。氯喹低浓度组小鼠视网膜GFAP绿色荧光表达明显少于PBS对照组、氯喹高浓度组,差异有统计学意义（F=23.66,P＆0.05 ）。低浓度氯喹组小鼠视网膜GFAP （F=110.20）、IL-6 （F=167.60）、TNF-α （F=17.78）mRNA表达较高浓度氯喹组、PBS对照组显著下降,差异有统计学意义（P＆0.010、＆0.001、＆0.010）。结论 低浓度氯喹对NMDA损伤所致RGC丢失有保护作用,其作用机制可能与抑制胶质细胞活化与炎症反应有关；高浓度氯喹会加重RGC凋亡。