碱性成纤维细胞生长因子对可见光诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响

摘要

目的观察外源性碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对可见光诱导培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡的影响. 方法以(2 000±500) lx白色荧光灯照射培养的人RPE细胞,利用荧光素标记的连接素V/碘化丙锭(annexin V-fluorescein isothiocyanate/ propidium iodium,Annexin V-FITC/PI)双染色流式细胞测定、细胞免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptional polymerase chain reaction,RT-PCR)、酶联免疫测定等方法,检测加入不同浓度的bFGF后,培养的RPE细胞的凋亡及细胞内bFGF、成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2)基因及半胱天冬酶-3(caspase-3)的变化. 结果 (1)分别加入外源性bFGF 10 、20 ng/ml时, RPE细胞凋亡比单纯光照组明显减少(P＜0.05);(2)加入bFGF 10 ng/ml组的bcl-2蛋白表达比单纯光照组明显增加(P＜0.01),而与无光照组之间差异无显著性意义(P＞0.05);(3)光照后bcl-2 mRNA表达比无光照组下降,但随着加入bFGF浓度的增高, bcl-2 mRNA表达又逐渐增加,当加入bFGF 20 ng/ml时,bcl-2 mRNA的表达与无光照组之间差异无显著性意义(P＞0.05);(4)无论是单纯光照组还是光照时加入各种浓度的bFGF组,其内源性bFGF及FGFR1的表达均较无光照组显著增加(P＜0.05),并呈bFGF浓度依赖性;(5)与单纯光照组比较,光照组加入外源性bFGF 10 ng/ml后,细胞内caspase-3活性明显降低(P＜0.05). 结论外源性bFGF可能通过RPE细胞内bFGF、FGFR1、 bcl-2的表达上调,caspase-3活性降低,而抑制可见光诱导的培养的人RPE细胞凋亡.