人眼脉络膜血管内皮细胞体外培养和细胞特征观察

摘要

目的 建立人眼脉络膜血管内皮细胞快速培养方法并观察细胞的特征,为研究与人眼脉络膜血管内皮细胞有的关眼部疾病提供体外研究模型.方法 采用胰酶、胶原酶对人眼脉络膜组织块进行两步消化,应用免疫磁珠CD31Dynabeads对消化后的细胞混合悬液分选纯化后获得人眼脉络膜血管内皮细胞并进行细胞培养;采用形态学观察、透射电子显微镜扫描、内皮细胞特异标志FⅧ因子、CD31、CD34的免疫组织化学染色观察培养的人眼脉络膜血管内皮细胞特征.结果 培养的细胞呈多边形、类圆形,细胞融合后呈铺路石样外观,传代后的细胞仍保持圆形或多边形,融合成单层时呈鹅卵石样排列,细胞表面吸附的磁珠明显减少;培养细胞胞浆内有内皮细胞特异性的棒状小体(Weibel-Palade小体),内皮细胞特异标志FⅧ因子、CD31、CD34染色阳性.结论 本实验研究成功培养出人眼脉络膜血管内皮细胞,纯度较高,方法易行,可获得足够实验研究的细胞数量.