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一种大鼠血管内皮细胞体外培养方法

摘要

本发明提供一种大鼠血管内皮细胞体外培养方法,包括取大鼠主动脉,用无菌PBS液进行冲洗,将其沉浸在含肝素的DMEM/F12培养液中;利用无菌针线将主动脉内膜翻转出来,并在两端打结;将翻转后的主动脉放在胶原酶中消化;在37℃温箱中培育后,将被消化的主动脉放入无血清的DMEM/F12培养液,并将其分割成小块的主动脉薄片;将主动脉薄片进行贴壁培养,主动脉薄片的主动脉内膜部分浸入含肝素和血清的DMEM/F12培养液,每隔48h更换一次培养液;第3‑5天,移除主动脉薄片,之后每天更换培养液,第9天即可获得大量的血管内皮细胞,第14天后可用于细胞传代。

著录项

  • 公开/公告号CN104673744B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2018-05-25

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 武汉市中西医结合医院;

    申请/专利号CN201510103424.5

  • 发明设计人 王俊力;陈国华;许慧芳;

    申请日2015-03-10

  • 分类号

  • 代理机构天津市宗欣专利商标代理有限公司;

  • 代理人孙乔乔

  • 地址 430000 湖北省武汉市汉口中山大道215号

  • 入库时间 2022-08-23 10:11:31

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2020-03-10

    未缴年费专利权终止 IPC(主分类):C12N5/071 授权公告日:20180525 终止日期:20190310 申请日:20150310

    专利权的终止

  • 2018-05-25

    授权

    授权

  • 2018-05-04

    著录事项变更 IPC(主分类):C12N5/071 变更前: 变更后: 申请日:20150310

    著录事项变更

  • 2018-05-04

    专利申请权的转移 IPC(主分类):C12N5/071 登记生效日:20180417 变更前: 变更后: 申请日:20150310

    专利申请权、专利权的转移

  • 2016-01-20

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N5/071 申请日:20150310

    实质审查的生效

  • 2015-06-03

    公开

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