一种新的成年大鼠成肌细胞体外批量扩增培养方法

摘要

目的:建立快速高效的成年大鼠成肌细胞分离、体外批量扩增培养的实验方法.方法:通过混合酶一步消化法从少量成年骨骼肌样品中分离成肌细胞;采用差速贴壁筛选法纯化分离并批量扩增成肌细胞.结果:混合酶一步消化法需要的时间为2.1±0.52 h,较之于传统方法所需要的6.8±0.67 h,分离细胞所需时阃显著缩短(P＜0.01);采用差速贴壁筛选法纯化分离的成肌细胞myf5/desmin阳性率＞97%,同传统分离扩增方法相比,体外批量扩增培养的这些成肌细胞具有典型的成肌细胞生长特性,在生长液中具有更好的增殖潜能,而在分化液中分化为肌营的特性无显著性差异(P＞0.05).结论:通过采用新建立的成年成肌细胞分离培养和批量扩增的方法,能够快速高效地获取高纯度的成肌细胞.