RNA干扰技术抑制Her2基因表达对卵巢上皮性癌细胞生物学特性的影响

摘要

目的应用 RNA 干扰技术,观察稳定转染 Her2基因的短发夹状 RNA（shRNA）对不同恶性程度的卵巢上皮性癌（卵巢癌）SKOV3和 SKOV3.ipl 细胞 Her2基因表达及细胞生物学特性的影响。方法将表达 Her2的质粒 pHer2 shRNA 分别转染 SKOV3和 SKOV3.ipl 细胞,经抗性筛选获得稳定转染的细胞系。RT-PCR 技术、蛋白印迹法检测转染前后细胞 Her2 mRNA 和蛋白的表达,体外侵袭实验观察转染前后细胞侵袭能力的改变,裸鼠接种肿瘤细胞观察转染前后细胞成瘤能力的改变。结果转染前后 SKOV3.ipl、SKOV3细胞的 Her2 mRNA 表达量分别为（99.9±1.3）%和（42.4±2.5）%、（68.0±3.1）%和（40.8±2.0）%,Her2蛋白的表达量分别为（98.2±1.7）%和（40.7±2.1）%、（72.1±3.4）%和（36.4±1.5）%,稳定转染后,两种细胞的 Her2基因表达均明显下降,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。稳定转染 pHer2 shRNA 后,SKOV3.ipl 细胞的穿膜细胞数由（36.2±9.7）个下降为（15.7±7.2）个,SKOV3的穿膜细胞数由（7.6±1.1）个下降为（1.8±0.8）个,细胞侵袭能力均显著下降,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。稳定转染 pHer2 shRNA 后,SKOV3.ipl 和 SKOV3细胞的成瘤重量分别由（1.55±0.31）g 下降为（0.69±0.20）g、（1.14±0.10）g下降为（0.38±0.03）g,两种细胞的成瘤能力均显著下降,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论（1）针对 Her2基因的 RNA 干扰技术可以显著降低卵巢癌细胞 Her2基因的表达水平。（2）经 RNA 干扰作用降低 Her2基因表达后,卵巢癌细胞的生物学特性改变,恶性度降低。