人绒毛膜癌鼠肺转移模型的建立及其生物学特性的初步观察

摘要

目的建立1种较为符合临床特征的人绒毛膜癌（绒癌）肺转移动物模型,初步观察其生物学特性,并探索成功建立模型的合适的细胞浓度、细胞数量。方法将40只5～6周龄重症联合免疫缺陷（SCID）小鼠随机分为4组,每组各10只,人绒癌细胞系JEG-3分别以1×10~7个细胞/ml×0.1 ml（A组）、5×10~6个细胞/ml×0.2 ml（B组）、1×10~6个细胞/ml×0.1 ml（C组）注入SCID小鼠尾静脉,另设对照组。接种后每3天观察1次小鼠状态,称量1次小鼠的体质量,绘制小鼠体质量变化曲线;当小鼠处于濒死状态时,用小动物成像CT（Micro CT）系统检查肺部有无转移灶、转移灶数目及大小。Micro CT检查后,解剖SCID小鼠,取肺部转移灶进行细胞的原代培养并行病理取材,HE染色、病理检查,免疫组织化学方法检测人绒毛膜促性腺激素β亚单位（β-hCG）的表达情况;原代培养细胞行免疫组织化学检测β-hCG的表达情况,并行染色体核型分析。结果 A组小鼠接种时全部死亡;C组接种时死亡2只,存活的8只在（30.0±2.0）d时,处于濒死状态,进行解剖未发现肺转移灶。B组接种时死亡3只,存活的7只在（18.0±2.0）d时,处于濒死状态;Micro CT检查,肺转移率为5/7,肺转移灶直径1.5～3.5 mm;病理检查证实为绒癌。原代培养的细胞行人绒癌标志物β-hCG染色,呈阳性表达;原代培养的细胞染色体核型分析为单体、三体和多体人源性染色体,细胞染色体数目19～128条,染色体众数为70～79条,符合恶性肿瘤的遗传学特征。结论通过尾静脉注射JEG-3细胞可以成功建立人绒癌SCID小鼠肺转移模型,5×10~6个细胞/ml×0.2 ml为建立模型的较为合适的细胞浓度及容积。