SATB1及wnt/β-catenin信号通路相关分子在子痫前期胎盘组织中的表达及意义

摘要

目的探讨富含AT序列的特异性结合蛋白1（SATB1）及蛋白（wnt）/β连环蛋白（β-catenin）信号通路相关分子在调控滋养细胞侵袭以及在子痫前期发病中的作用。方法收集2013年3月–2014年3月在重庆医科大学附属第一医院行人工流产术的20例孕8～10周孕妇的绒毛组织（早孕组）;同期在妇产科住院行水囊引产的18例中孕期（孕18～20周）孕妇的胎盘组织（中孕组）;同期行择期剖宫产术的20例健康足月妊娠孕妇的胎盘组织（正常足月组）;同期住院行选择性剖宫产术分娩的20例子痫前期孕妇（孕33～38周）的胎盘组织（子痫前期组）。采用免疫组化SP法检测各组绒毛或胎盘组织中SATB1及β-catenin的蛋白表达定位;采用蛋白印迹法检测各组绒毛或胎盘组织中SATB1及β-catenin的蛋白表达水平;采用细胞免疫荧光法检测SATB1及β-catenin在滋养细胞株HTR8/SVneo细胞中的定位表达, 并对细胞中SATB1及β-catenin蛋白表达水平进行检测;采用免疫共沉淀法检测子痫前期组胎盘组织和缺氧/复氧组HTR8/SVneo细胞中的SATB1与β-catenin的相互关系;采用明胶酶谱法检测子痫前期组和缺氧/复氧组细胞中基质金属蛋白酶（MMP）2、9的活性水平。结果 （1）正常足月组胎盘组织合体滋养细胞结节和纤维素样坏死很少见, 毛细血管数目丰富;子痫前期组胎盘组织可见合体滋养细胞胞核空泡化明显, 有较多纤维素样坏死, 绒毛内微血管数目减少。（2）各组绒毛或胎盘组织中均可见SATB1棕黄色染色颗粒, 子痫前期组胎盘组织中SATB1阳性染色强度较正常足月组明显减弱。（3）各组绒毛或胎盘组织中均可见β-catenin蛋白的表达, 子痫前期组胎盘组织中β-catenin阳性染色强度较正常足月组减弱。（4）早孕组、中孕组、正常足月组及子痫前期组中SATB1蛋白表达水平分别为0.300±0.009、0.271±0.015、0.238±0.018及0.153±0.007;β-catenin蛋白表达水平分别为0.743±0.041、0.648±0.021、0.549±0.069及0.269±0.047。子痫前期组SATB1及β-catenin蛋白表达水平均较早孕组、中孕组、正常足月组明显下降, 分别比较, 差异均有统计学意义（P＆0.05）。（5）常氧组及缺氧/复氧组SATB1蛋白定位于细胞滋养细胞的胞核中, 缺氧/复氧组细胞的荧光强度较常氧组细胞明显减弱;常氧组及缺氧/复氧组β-catenin蛋白定位于细胞滋养细胞的胞核及胞质中, 缺氧/复氧组细胞的荧光强度较常氧组细胞明显减弱。（6）常氧组细胞SATB1及β-catenin蛋白表达水平分别为0.213±0.005和0.797±0.081, 而缺氧/复氧组分别为0.083±0.021和0.543±0.131。两组分别比较, 差异均有统计学意义（P＆0.05）。（7）子痫前期组胎盘组织中和缺氧/复氧组细胞中经SATB1抗体免疫共沉淀后的蛋白复合物中, 均可检测到β-catenin蛋白的表达;同样, 经β-catenin抗体免疫共沉淀后的蛋白复合物中, 也均可检测到SATB1蛋白的表达。（8）子痫前期组胎盘组织中MMP-2、9活性水平分别为2.251±0.310、1.447±0.102, 正常足月组分别为7.098±0.451、5.502±0.197, 两组分别比较, 差异有统计学意义（P＆0.05）。缺氧/复氧组细胞中MMP-2、9活性水平分别为0.471±0.104、0.297±0.103, 常氧组分别为0.842±0.209、0.595±0.100, 缺氧/复氧组细胞明显低于常氧组, 分别比较, 差异均有统计学意义（P＆ 0.05）。结论子痫前期胎盘组织中SATB1表达水平下降, 可能是通过调控wnt/β-catenin信号通路而影响MMP-2、9的活性水平改变, 使滋养细胞的侵袭力减弱, 最终导致子痫前期的发生。