老瓜头生物总碱对LPS诱导RAW264.7细胞中COX-2酶活性、mRNA及蛋白表达的影响

摘要

目的:研究老瓜头生物总碱(TACKI)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7在COX-2酶活性、基因表达及蛋白表达的影响.方法:采用LPS诱导RAW264.7细胞作为炎症模型,以非甾体抗炎药选择性COX-2酶抑制剂塞来昔布作为阳性对照.MTT比色法分析TACKI对RAW264.7生长活性的影响,LPS长时间刺激RAW264.7,ELISA检测细胞上清液中前列腺素-E2(PGE2)活性,以PGE2的活性反映COX-2的酶活性,半定量RT-PCR检测RAW264.7细胞中COX-2 mRNA的表达,免疫荧光观察RAW264.7细胞中COX-2的表达,Western blotting法检测COX-2蛋白表达.结果:与LPS组比较,TACKI 0.1,1μg·L-1能减弱COX-2酶活性(P＜0.05),TACKI 0.01,0.1,1μg·L-1可下调COX-2 mRNA的表达(P＜0.05),TACKI 0.1,1 μg·L-1能减少COX-2蛋白表达(P＜0.05).结论:TACKI减弱LPS诱导RAW264.7细胞COX-2酶活性,对LPS诱导RAW264.7细胞中COX-2基因表达及蛋白表达抑制作用明显.