芍药苷激活自噬对帕金森病小鼠运动能力及多巴胺能神经元的影响

摘要

目的探讨芍药苷激活自噬对PD小鼠运动能力及多巴胺能神经元的影响。方法将40只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、芍药苷组和芍药苷+3-甲基腺嘌呤（3-MA）组,每组10只。后3组小鼠连续7 d腹腔注射1-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）[30 mg/（kg·d）]制备成亚急性PD模型,期间芍药苷组和芍药苷+3-MA组小鼠分别腹腔注射芍药苷[30 mg/（kg·d）]和芍药苷[30 mg/（kg·d）]+3-MA[2 mg/（kg·d）]。第8天时采用爬杆实验和悬挂实验评估各组小鼠的运动能力,之后取中脑黑质,采用TUNEL染色检测神经细胞凋亡情况,采用免疫组化染色检测酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞数及α-突触核蛋白（α-Syn）、溶酶体相关膜蛋白2A（LAMP2A）、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）表达,采用Western blotting实验检测LAMP2A、LC3-Ⅱ蛋白水平。结果与模型组比较,芍药苷组小鼠的爬杆时间明显缩短,悬挂实验评分明显升高,凋亡神经细胞数量明显减少,TH阳性细胞数及LAMP2A、LC3-Ⅱ表达明显升高,α-Syn表达明显减少,LAMP2A、LC3-Ⅱ蛋白水平明显升高,差异均有统计学意义（P＆0.05）。与芍药苷组比较,芍药苷+3-MA组小鼠的爬杆时间明显延长,悬挂实验评分明显降低,凋亡神经细胞数量明显增多,TH阳性细胞数及LAMP2A、LC3-Ⅱ表达明显减少,α-Syn表达明显升高,LAMP2A、LC3-Ⅱ蛋白水平明显降低,差异均有统计学意义（P＆0.05）。结论芍药苷通过诱导自噬清除α-Syn,保护多巴胺能神经元,从而改善PD小鼠的运动障碍。