变性高效液相色谱在检测肝豆状核变性基因突变中的作用

摘要

目的建立变性高效液相色谱(denaturing high Performance liquid chromatography,DHPLC)技术检测肝豆状核变性(WD)基因第8外显予突变.方法利用聚合酶链式反应(PCR)扩增WD基因第8外显子片段,扩增产物直接进行DHPL(分析;对峰型有改变的样品经测序分析确认突变.结果在51例WD先证者中共发现两种错义突变(Arg778Leu和Arg778Gln)、一种插入突变(Ins2302C)和一种多态性位点(C2310G).其中12例先证者带有Arg778Leu杂合错义突变,3例为Arg778Leu纯合错义突变,1例为Arg778Gln杂合错义突变,1例为杂合2302C插入突变.多态位点C2310G与Arg778Leu突变完全连锁.结论 WD基因第8外显子阳性检出率为33.3%(17/51),说明DHPLC技术是一种可用于临床WD基因诊断的高效、灵敏和操作简便的方法.