白细胞介素18、单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因联合修饰骨髓间充质干细胞治疗脑胶质瘤

摘要

目的 了解骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs)联合转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因(HSV-tk)和白细胞介素 18(interleukin-18,IL-18)后在荷瘤大鼠体内的治疗作用.方法 提取1周龄大鼠骨髓培养大鼠骨髓间充质干细胞.骨髓间充质干细胞转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因(BMSCs/tk) 或白细胞介素 18 (BMSCs/IL-18) 或联合转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因、白细胞介素 18 (BMSCs/tk/IL-18),而后进行体内外试验检测其抗肿瘤作用.检测荷瘤鼠脾脏淋巴细胞免疫活性,采用TUNEL 方法检测胶质瘤内的凋亡细胞,抗-CD34染色检测微血管密度(MVD),检测淋巴细胞的浸润,记录试验大鼠的生存期. 结果骨髓间充质干细胞可稳定转染IL-18及tk基因,BMSCs/tk 和 BMSCs/IL-18/tk 均显示了明显的旁观者效应,荷瘤鼠移植BMSCs/IL-18或 BMSCs/IL-18/tk 后,血清白细胞介素2和干扰素-γ浓度明显增高,并且接受移植的荷瘤鼠再次受到C6细胞冲击后可诱导快速的抗肿瘤免疫反应.微血管密度检测显示,BMSCs/IL-18(4.50±2.19)、BMSCs/tk/IL-18(3.65±2.13)与对照组(7.15±2.11)、PBS组(7.55±1.64)、BMSCs组(7.80±2.28)、BMSCs/tk组(7.65±1.84) 比较有明显低的微血管密度(P<0.05),通过TUNEL 检测、浸润淋巴细胞计数、细胞因子浓度及荷瘤鼠生存期比较, BMSCs/IL-18/tk比BMSCs/IL-18或BMSCs/tk显示了更加明显的抗肿瘤作用,BMSCs/IL-18/tk组生存期明显延长. 结论联合转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因和白细胞介素 18的骨髓间充质干细胞显示了明显的抗恶性胶质瘤作用,骨髓间充质干细胞可能成为一种理想的治疗颅内胶质瘤的基因治疗载体.