c-Abl通过p53信号通路促进高糖诱导的足细胞凋亡

摘要

目的研究非受体酪氨酸激酶蛋白c-Abl在高糖诱导足细胞损伤中的作用及可能的信号转导通路。方法体外培养条件永生性小鼠足细胞,并用不同浓度葡萄糖不同时间刺激已分化足细胞,免疫荧光染色和Western印迹检测足细胞中c-Abl蛋白的表达和分布改变。采用c-Abl siRNA转染沉默足细胞表达c-Abl,细胞分成正常对照组（5 mmol/L葡萄糖）、高渗对照（25 mmol/L甘露醇）组、高糖组、高糖+c-Abl siRNA组。应用流式细胞术及Hoechst33258染色评价足细胞凋亡水平,Western印迹法检测c-Abl及p53蛋白的表达水平,免疫荧光染色观察足细胞内c-Abl分布的改变,免疫共沉淀法检测c-Abl与p53蛋白的结合水平。结果与对照组比较,高糖刺激导致足细胞凋亡率增加（P＜0.05）;c-Abl表达水平增加（P＜0.05）,并以时间和浓度依赖方式增加且存在核转移现象;同时p53蛋白表达水平上调,c-Abl与p53的结合水平增加（均P＜0.05）。与高糖组比较,c-Abl siRNA转染后c-Abl蛋白表达水平降低（P＜0.05）且核转移减弱,高糖诱导足细胞凋亡率下降（P＜0.05）,且c-Abl与p53结合水平降低（P＜0.05）。上述各项高渗组与对照组差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论c-Abl蛋白是高糖诱导足细胞损伤的促凋亡因子,其作用机制与p53信号通路有关。