白念珠菌TFP1基因与钙调神经磷酸酶通路的相关性分析

摘要

目的 构建白念珠菌TFP1基因敲除株,并初步分析白念珠菌TFP1基因与钙调神经磷酸酶通路相关基因的关系.方法 通过融合PCR将白念珠菌TFP1基因上下游和营养缺陷筛选标记连接组成基因敲除组件,再运用醋酸锂转染法将一条基因敲除组件转入白念珠菌工程菌SN152,在营养缺陷平板上筛选出TFP1+/-菌株,再运用同样的方法敲除第2条等位基因.采用实时荧光定量PCR的方法检测TFP1-/-菌株、TFP1+/-菌株以及SN152菌株RTA2和CRZ1基因的表达量.结果 成功构建白念珠菌TFP1双等位基因敲除株,并且双等位基因敲除株中RTA2和CRZ1基因表达量均下降.结论 敲除白念珠菌TFP1基因影响钙调神经磷酸酶通路相关基因RTA2和CRZ1的表达.