巨噬细胞对新生隐球菌主要毒性基因表达的影响

摘要

目的 研究巨噬细胞对新生隐球菌B3501标准株的主要毒性基因表达影响.方法 将对数生长期的J774.16巨噬细胞分别与新生隐球菌野生株B3501共孵育4 h,收集被J774.16吞噬的B3501作为实验组,提取实验组和在37℃条件下5%二氧化碳单独培养的对照组B3501的RNA,采用实时荧光定量PCR技术,检测J774.16细胞内和对照组B3501的CNLAC1、CAP60、URE1、NMT表达的差异.结果 实验组中新生隐球菌的CAP6,CNLAC1,NMT及URE1基因的mRNA在每百万看家基因(GAPDH基因)中的平均含量分别为(2.698±0.084)×104,(1.806±0.322)×103,(2.267±0.074)×104和(4.041±0.271)×104;而对照组这4种毒性因子基因含量分别为:(1.139±0.183)×106,(9.324士5.028)×103,(1.326±0.028)×106和(1.307±0.001)×106,均远比实验组高,其中以NMT最为明显.结论 新生隐球菌被巨噬细胞吞噬后,主要的毒性因子基因表达下降,其中以NMT最为明显,而CNLAC1下降幅度最小.