大蒜素对大鼠心力衰竭模型心室肌细胞迟后除极和触发活动的作用

摘要

目的 观察大蒜素对大鼠心力衰竭模型细胞迟后除极(DAD)、触发活动(TA)和离子流的作用及机制.方法 选取20只SD大鼠利用腹主动脉结扎法制备大鼠心力衰竭模型(模型组),另选取10只SD大鼠制作假手术组作为对照.采用酶解法急性分离2组大鼠心室肌细胞.根据实验设计对模型组是否给以大蒜素干预分为心力衰竭组(未给药)及给药组(200.0μmol/L大蒜素).膜片钳技术观察心力衰竭组、给药组及对照组细胞DAD和TA的发生,并记录相关离子流(Iti,ICa,L,INCX)的改变,以Flou-4AM荧光技术检测细胞内钙离子浓度变化.采用SPSS 17.0软件进行统计学分析.组间比较采用ANOVA分析及SNK-q检验.结果 (1)对照组、心力衰竭组及给药组细胞上DAD和TA发生率依次为[13.3％(2/15),0.0％(0/15)]、[60.0％(9/15),26.7％(4/15)]和[40.0％(6/15),13.3％(2/15)].与对照组比较,心力衰竭组细胞DAD和TA发生率显著增加;与心力衰竭组比较,给药组细胞上DAD和TA发生率显著下降,下降幅度分别为20.0％和13.4％,差异均有统计学意义(n=15,P<0.01).(2)与对照组比较,心力衰竭组心室肌细胞上ICa,L、Iti和INCX电流密度均增加,而与心力衰竭组比较,给药组上述电流均减少,其中Iti内向峰电流密度从(-1.05±0.06)pA/pF降至(-0.53±0.05)pA/pF(n=10,P<0.01),INCX内向电流密度从(-5.8±0.7)pA/pF降至(-4.2±0.4)pA/pF(n=10,P<0.01).同时,给药组通过大蒜素加速通道电流的稳态失活过程,降低ICa,L,ICa,L的峰电流密度由(-17.2±0.9)pA/pF降为(-13.5±1.0)pA/pF(n=15,P<0.01).(3)与对照组比较,心力衰竭组细胞静息态钙浓度、钙瞬变幅度和胞内钙最高50％的时间等参数显著升高;与心力衰竭组比较,上述参数在给药组细胞中均显著降低(n=15,P<0.01).心力衰竭组细胞内钙瞬变衰减率与对照组比较显著下降,而应用大蒜素后,得到显著恢复(P<0.05).结论 大蒜素可能通过减少心力衰竭大鼠心室肌细胞内的钙离子,阻滞Iti和INCX电流,从而降低心力衰竭后DAD和TA的发生.