一种大鼠压力超负荷对心室肌细胞Bax、Bcl的影响

摘要

一种大鼠压力超负荷对心室肌细胞Bax、Bcl的影响，将所分离出的心肌细胞计数，各取1×106个细胞，分别加入4支试管中；40g・L‑１多聚甲醛固定60min，1500r/min离心，PBS清洗2次；将细胞重悬于10mL・L‑１ Tween80中30min,1500r/min离心，PBS清洗3次；每管加入封闭用羊血清100μL,20min，5mLL‑１Tween80清洗1次，PBS清洗2次；每试管中加入100μL1：100的小鼠抗大鼠Bax或Bcl2抗体，室温下孵育30min，加入5mL・L－１ Tween80孵育5～10min，1500r/min离心，PBS清洗2次；各试管中加入PBS 400μL，使用ALTRA流式细胞仪进行Bax和Bcl2蛋白的检测，结果用Bax、Bcl2的表达率和平均荧光强度表示。