C1q/TNF相关蛋白3减轻氧化应激诱导的间充质干细胞衰老

摘要

目的 建立间充质干细胞(MSCs)衰老模型,探讨C1q/TNF相关蛋白3(CTRP3)对衰老MSCs的作用并初步探讨机制.方法 用过氧化氢(H2 O2)诱导小鼠MSCs衰老,CCK8实验和 β-半乳糖苷酶染色验证模型的建立.外源性给予CTRP3处理MSCs 24 h,CCK8实验检测增殖活性,β-半乳糖苷酶染色检测MSCs衰老,分化诱导实验检测MSCs分化能力,Western blotting法检测MSCs凋亡.RT-PCR检测MSCs中衰老相关基因P16、P21以及抗衰老基因SIRT1的mRNA表达变化.采用GraphPad Prism 6进行统计分析.组间比较采用方差分析或LSD两两比较.结果 H2 O2可抑制MSCs的增殖活性,且呈浓度依赖性.与正常对照组相比,200μmol/L H2 O2作用4 h,细胞立体感消失,细胞形态不规则;CCK8染色结果显示细胞增殖活性显著下降;β-半乳糖苷酶阳性细胞百分比显著升高.继续CTRP3处理24 h后,衰老MSCs增殖和分化能力增强.Western blotting结果表明CTRP3可显著减低衰老MSCs的凋亡.RT-PCR检测发现CTRP3上调MSCs抗衰老基因SIRT1 mRNA表达,并且下调衰老相关基因P16、P21 mRNA的表达.结论 CTRP3可抑制MSCs衰老,SIRT1基因表达水平上调,及P16、P21基因表达水平下调可能是其重要机制.