p38 MAPK在内毒素休克小鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶表达中的作用

摘要

目的观察脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的变化趋势,探讨p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38 MAPK)在内毒素休克发生中的作用.方法复制小鼠内毒素休克动物模型,分别观察LPS作用和组织中iNOS表达的时间过程、剂量-效应关系及p38 MAPK在其中的作用.动物在LPS处理后,收集血液,用Griess法检测血浆一氧化氮(NO)水平;取肺、肝、肾等组织样本,分别用Western印迹法和RT-PCR检测组织iNOS蛋白和mRNA表达,用免疫沉淀和放射自显影检测组织p38 MAPK活性.结果①腹腔注射LPS后可引起双峰型进行性的动脉血压下降,6h后达到重度休克;②iNOS在正常肺中就有少量表达,注射内毒素后肺组织iNOS mRNA和蛋白表达增加,血浆中NO水平升高,它们与LPS存在剂量-效应关系,并且在一定的时间范围内,随着LPS作用时间的增加iNOS表达也增高;③注射LPS后,在心、肝、脾、肺、肾、肠等组织中,肺iNOS表达最早,水平最高;④LPS注射的小鼠iNOS表达增高的同时,肺中p38 MAPK信号转导通路被激活;用p38 MAPK特异性抑制剂SB203580后,可以显著降低血浆 NO 水平及肺组织中iNOSmRNA和蛋白的表达,但对血压下降并无显著性影响.结论在正常情况下,小鼠肺组织有少量iNOS表达,内毒素休克时全身多种器官中以肺组织iNOS表达最为显著,p38 MAPK信号通路参与了内毒素休克时iNOS表达的发生.提示肺有可能是休克时多器官功能不全综合征发生最早的始动器官之一,阻断p38 MAPK信号通路为防治内毒素休克提供了一条新途径.