Wip1基因在人脑胶质瘤细胞恶性增殖中的作用及其机制

摘要

目的 研究Wip1基因在人脑胶质瘤细胞增殖的作用及机制.方法 构建人Wip1基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默胶质瘤细胞U251及U87-MG细胞的Wip1基因表达,检测细胞增殖能力.流式细胞术PI单染法检测Wip1基因沉默后细胞周期分布.实时定量PCR法及Western blotting分别检测差异性基因mRNA及蛋白表达.结果 胶质瘤细胞Wip1基因表达被有效沉默.Wip1基因沉默的胶质瘤细胞增殖变慢,在U87-MG细胞更加明显.细胞周期分析显示:Wip1基因沉默对U251细胞周期无明显影响,而U87-MG细胞则在10d时出现明显S期增多和G1、G2期细胞减少.Wip1基因沉默后,U251细胞中CDKN2A和p14ARF基因表达下调,而在U87-MG细胞中表达均上调.Western blotting结果显示:在U251与U87-MG胶质瘤细胞中p 38MA PK表达均上调.在U87-MG细胞中p53及p-p53 (Ser 15)表达均上调,但在U251细胞中无明显变化.结论 Wip1对胶质瘤细胞增殖具有重要作用.在U87-MG细胞增殖作用主要与其调节p53功能有关.