011 血管平滑肌细胞增殖与迁移的机制研究

摘要

目的: 研究血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖与迁移在动脉粥样硬化(AS)的早期、中期或AS进展期或血管事件的发病机制中的作用. 方法: 采用改良的Boyden小室法检测VSMCs的迁移效应; 以MTT法、 3H-TdR掺入法、 3H-脯氨酸标记法和VSMCs计数评价VSMCs的增殖效应; 将培养的VSMCs分为5组: 2%胎牛血清(2% FCS)组、 AngⅡ组(其浓度为10-10～10-6 Mol/L)、 Losartan组(其浓度为10-7～10-5 Mol/L)、 MCP-1mcAb组(终浓度为10 μg/ml)和阳性对照组(含5%的酵母多糖活化血清). 结果: (1) 对照组也有少量的VSMCs移动, 提示胎牛血清中有生理量的VSMCs的趋化物质或生长因子; 在AngⅡ组中, VSMCs的迁移数量随着AngⅡ浓度由10-10～10-6 Mol/L的增加而明显的增加(P<0.01); Losartan或MCP-1mcAb均能显著地抑制AngⅡ介导的VSMCs的迁移效应(P<0.01). (2) AngⅡ促进VSMCs对MTT的摄取与代谢、 VSMCs内DNA和蛋白质合成量; Losartan或MCP-1mcAb均能抑制VSMCs内细胞代谢、 DNA和蛋白质合成量; AngⅡ、 MCP-1mcAb、 Losartan对VSMCs的计数均无明显影响(P<0.05). 结论: (1) AngⅡ和MCP-1系VSMCs迁移与增殖的主要因子, 其机制均通过AT1所介导, AngⅡ在10-12 Mol/L浓度时无上述效应, 在10-10～10-6 Mol/L浓度仅在超生理浓度情况下, 才发生病理性反应. (2) AngⅡ受体1(AT1)拮抗剂Losartan或单核细胞趋化蛋白-1抗体(MCP-1mcAb)均能有效的抑制VSMCs迁移与增殖效应, 一方面为Losartan或MCP-1mcAb防治AS提供一定的理论依据; 另一方面提示AngⅡ或MCP-1虽然是VSMCs迁移与增殖的主要因子, 但并非唯一的因子, 从而提示VSMCs迁移与增殖效应系多因子的综合作用.