B群脑膜炎球菌重组H因子结合蛋白的免疫原性研究

摘要

目的 通过检测血清抗体滴度和杀菌抗体检测(SBA)评价重组H因子结合蛋白(fac-tor H binding protein,fHBP)的免疫原性.方法 选择并合成fHBP序列,连接至pET43.1a质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达两个亚家族的重组fHBP蛋白,fHBPA和fHBPB,经过纯化后免疫家兔和小鼠,通过ELISA和SBA试验检测免疫抗血清效价和B群脑膜炎球菌流行菌株的杀菌滴度.结果fHBP免疫兔血清效价均大于2.0×106,免疫小鼠血清效价高于1.0×106.69株流行株SBA试验中fHBP免疫兔血清对41株A亚家族和20株B亚家族均有大于1 ∶ 128杀菌滴度,亚家族靶菌之间没有交叉保护作用.fHBPA小鼠血清对A亚家族流行株Nm210902、Nm211009、Nm450522平均滴度为1∶1 024、1 ∶ 608、1∶ 861,对 Nm510703、Nm311304、Nm431002流行株的滴度为 1 ∶ 234、1 ∶ 861、1 ∶ 430;fHBPB小鼠血清对B亚家族流行株Nm311302、Nm311113和Nm321114的杀菌滴度分别是1 ∶ 2 896、1 ∶ 1 878和 1 ∶ 430.而 fHBPA 和 fHBPB 混合蛋白质免疫鼠血清 Nm210902、Nm510703和Nm311302平均滴度分别1 ∶ 876、1 ∶ 274、1 ∶ 1858,对3株靶菌均存在有效杀菌.结论 fHBP免疫抗血清效价均在1.0×106水平以上,对61株B群流行株的杀菌滴度大于1 ∶ 128,对69株B群脑膜炎球菌流行株有94.2％的保护效果.