跨膜型肿瘤坏死因子信号肽氨基酸部分缺失对细胞毒作用影响

摘要

目的探讨跨膜型肿瘤坏死因子(TM-TNF)信号肽在其杀瘤中的作用.方法用PCR构建突变体及体外转录、翻译蛋白质,分别获得TM-TNF信号肽胞浆段、胞外与分泌型肿瘤坏死因子(S-TNF)连接段以及部分跨膜段缺失即信号肽第-73～-47、-73～-34、-34～-1、-21～-1位氨基酸缺失的TM-TNF体外翻译蛋白.用MTT法检测其对HL-60细胞的杀伤率.结果-34～-1、-21～-1位氨基酸缺失可提高TM-TNF对HL-60细胞的杀伤,-73～-47位氨基酸缺失对其杀瘤力无明显作用,而-73～-34位氨基酸缺失可使其杀瘤率明显下降.结论去除信号肽胞外段可提高TM-TNF-α对HL-60细胞的杀伤率,而TM-TNF-α信号肽-47～-34位氨基酸在其杀瘤过程中有重要作用.