应用原代人呼吸道上皮细胞（HAE）分离鉴定陈旧性呼吸道样本中流感病毒

摘要

目的采用分化良好的原代人呼吸道上皮细胞（HAE）对陈旧性呼吸道样本中流感病毒H3N2分离并与MDCK细胞进行比较。方法选择青海地区1株2010年因不明原因肺炎采集的鼻咽拭子标本,经检测流感核酸弱阳性,血凝阴性。分别接种等量的呼吸道样本于HAE和MDCK细胞并进行传代,观察细胞病变,电镜观察病毒形态,测定全基因组序列,同时测定血凝活性。结果MDCK细胞无法分离获得病毒,但HAE可成功分离病毒:盲传3代后,可观察明显细胞病变;电镜下为典型的流感病毒形态;流感血凝抑制活性1:16;经病毒基因组序列测定确定为近年来流行的季节性流感病毒H3N2,命名A/Qinghai/178/2010（H3N2）,其序列与南京2010年流行株A/Nanjing/1655/2010（H3N2）亲缘关系最近。结论HAE可应用于陈旧性呼吸道样本的病毒分离鉴定,用于流感病毒分离比MDCK细胞更灵敏。