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同亚型抗血清参考品在甲型H7N9禽流感病毒血凝素含量检测中的适用性研究

         

摘要

目的在无甲型H7N9禽流感病毒特异性抗血清的情况下,研究现有的H7亚型抗血清用于单向免疫扩散试验(SRID)的适用性,以建立应急情况下检测抗原含量的方法。方法获得英国国家生物制品检定所(NIBSC)已有的4种H7亚型抗血清参考品,对其制备用毒株与H7N9毒株的血凝素序列进行对比,之后通过双向免疫扩散试验比较其效价,根据同源性比对结果及双扩效价确定适用的抗血清,并以SRID方法验证检测H7N9抗原的可行性。结果 NIBSC 07/278号参考品制备使用的毒株(H7N3哑型)与HTN9血凝素氨基酸序列同源性最高,为97.14%;与H7N9抗原的双扩效价达到1:8。以此抗血清进行SRID试验,H7N9抗原浓度10~40μg/ml时,能够形成清晰的沉淀环,回归曲线线性R~2>0.99。结论在无H7N9特异性抗血清的情况下,NIBSC 07/278编号抗血清能够用于H7N9疫苗的血凝素含量的应急检测。

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