高强度聚焦超声介导脂质体pEGFP-N1质粒转染胰腺癌细胞的实验研究

摘要

目的 通过观察高强度聚焦超声(HIFU)介导脂质体增强型绿色荧光蛋白质粒pEGFP-N1转染辐照后残余活细胞的效率,探讨HIFU联合基因治疗胰腺癌的可行性.方法 HIFU辐照胰腺癌PANC-1、CFPAC-1细胞,热电偶测温仪记录温度变化,锥虫蓝染色试验检测辐照后即刻杀伤效应,CCK-8试剂盒测定存活细胞生长曲线.辐照后立即加入脂质体pEGFP-N1质粒转染48 h,荧光显微镜观察存活细胞中GFP瞬间转染阳性率.比较在不同发射功率及时问作用下温度、细胞活力与转染效率变化特征.结果 辐照功率30、50、70 W/cm2的平台期温度及达到平台期时间分别为47℃、61 s,62℃、44 s,82℃、33 s.在辐照功率为70 W/cm2、辐照10 s时温度为56.51℃.胰腺癌PANC-1、CFPAC-1细胞即刻活力分别为(85.91±2.23)%、(84.35±1.65)%;辐照后48 h存活细胞的增殖抑制率分别为56.47%、44.60%;存活细胞中脂质体pEGFP-N1质粒瞬间转染率分别为(68.31±2.61)%、(65.85±6.70)%,较对照组分别增加3.7倍和4.3倍.两株细胞在温度变化、细胞破坏、细胞增殖及抑制、质粒转染效率等方面没有统计学差异.结论 HIFU在灭活胰腺癌细胞的同时,可促进辐照区域存活细胞的基因转染,HIFU联合基因治疗具有可行性.