肺腺癌SPC-A1细胞双向电泳图谱的优化

摘要

双向电泳技术+质谱技术已经成为蛋白组学研究的基本策略之一.获得细胞或组织经过某种处理前后的双向电泳图谱,然后经专业2-D图像分析软件找到差异表达(有无的差异或是表达量的差异)的蛋白质斑点,再经过质谱分析鉴定这些蛋白质的种类,可以全面、系统地研究该处理因素对总蛋白质表达的影响.而要想准确地获得某种组织或细胞的双向电泳图谱,建立与之兼容的方法必不可少.本文通过使用和SPC-A1细胞株兼容的总蛋白质抽提方法,采用不同pH梯度的IPG(immorbilized pH gradient)干胶条,获得了较为清晰的蛋白质斑点,并重点分离了特定局部区域的蛋白质,优化了本细胞株的双向电泳图谱,为进一步分析药物处理前后的总蛋白质表达差异创造了条件.