HLA-G 3'UTR基因多态性与不明原因复发性流产发生风险的相关性研究

摘要

目的 探讨人类白细胞抗原G3'非翻译区(human leucocyte antigen-g 3'untranslated region,HLA-G3'UTR)基因单核苷酸多态性以及单倍型在不明原因复发性流产患者中的分布情况及可能的预测作用.方法 采用病例对照研究.选择2017年6月至2018年7月温州市中医院70例不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)妊娠患者(病例组)以及54例产前检查健康妇女(对照组),采集外周全血和血清.离心柱法提取外周全血基因DNA,PCR扩增HLA-G 3'UTR DNA.Sanger测序法测得基因序列并进行基因分型.SHEsis在线软件分析单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点等位基因和基因型的频率,比较分析对照组和病例组的分布差异.Phase软件构建单倍型.ELISA检测血清可溶性HLA-G (soluble human leucocyte antigen-G,sHLA-G)浓度.两组间SNP位点基因型及单倍型比较采用x2检验,两组sHLA-G浓度比较采用t检验.结果 URSA组和对照组均检测出8个多态性位点,包括14bp ins/del、+3003C/T、+3010G/C、+3027A/C、+3035C/T、+3142C/G、+3187A/G及+3196C/G,均符合哈迪-温伯格平衡(Hardy-Weinberg,H-W)检验平衡检验,比较分析显示+3010G/C、+3142C/G、+3187A/G三个位点在两组间的分布差异有统计学意义(x2=8.514,P=0.004;x2=0.552,P=0.021;x2=8.183,P=0.005).携带+3010C等位基因、+3142G等位基因患病风险相对较高(OR=2.131,95％CI=1.278～3.552,x2=8.514,P=0.004;OR=1.813,95％CI=1.091～3.013,x2=0.552,P=0.021);携带+3187G等位基因患病风险相对较低(OR=0.476,95％CI=0.285～0.794,x2=8.183,P=0.005).8个位点紧密连锁,单倍型分析显示UTR-1(DTGCCCGC)可能是URSA的保护因素(OR=0.497,95％CI=0.295～0.837,x2=6.987,P=0.008),UTR-3(DTCCCGAC)可能是URSA的危险因素(OR=1.732,95 ％CI=1.009～2.974,x2=3.998,P=0.045).UTR-1/UTR-1纯合子频率在URSA患者中显著低于健康妊娠人群(OR=0.381,95％CI=0.165～0.879,x2=5.292,P=0.024),可能是URSA的一个保护因素.未发现血清sHLA-G与HLA-G 3'UTR基因单倍型的关联性(t=1.578,P=0.119).结论 HLA-G 3'UTR基因多态性及单倍型与URSA具有一定相关性,可能为临床诊疗和预测提供依据.